亚细胞***-思特进(推荐商家)

发布时间：2019-12-11 09:49:31

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存植物***工程育种中，与导入一个功能***相比，导入一个关键的调控***的改良效果更好。而***的表达调控是在多级水平上参加的复杂事件，其中转录起始是***表达的的调节环节，翻译以及翻译后加工是***表达的基本控制点。囚此本研究以刚毛柽柳(Tamarix hispida)的转录因子ThDREB和翻译起始因子TheIFIA两个***为研究对象，对***的表达和功能进行了初步研究，以期为抗逆***工程育种提供理论依据和***材料。

目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞***，确定其功能区域，并比较3种瞬时表达体系在亚细胞***研究中的优劣。方法从白木香愈伤***中提取总RNA，采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS***，并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上，分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体，分别利用根***农侵染叶片、***枪轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达，激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞***。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中，融合蛋白绿色荧光均能被观察到。ASS***与GFP的融合蛋白产物在叶片中***于胞质，在洋葱表皮中***于胞质和细胞核，白木香原生质体中***于胞质和质体。结论 ASS***在白木香原生质体胞质及质体***;对3种体系的结果比较表明，亚细胞***，应用不同体系研究蛋白的亚细胞***可能出现不同的结果，这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。

泛素-蛋白酶体通路在植物防卫反应(包括反应)中发挥重要作用，泛素连接酶(ubiquitin ligase， E3)则是参与这一过程的重要组分。本研究旨在通过和分析与马铃薯晚疫病抗性相关的泛素连接酶家族中的成员，初步揭示这类***在马铃薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的调控作用，或它们在马铃薯防御晚疫病菌侵染的信号传导网络中的作用，为进一步深入开展抗性机理研究奠定基础。本实验室从晚疫病诱导的马铃薯水平抗性材料构建的cDNA文库中筛选出两个与***r9/Cf-9 rapidly elicited protein (ACRE，具有泛素连接酶E3活性)***有很高同源性的EST片段(10-A12和08-E12)。本研究中，我们了这两个EST片段所代表的***，StRFP和StPUB，并研究了其生物学功能。 StRFP***的全长cDNA为1354 bp，包含一个789 bp的开放阅读框(ORF)，编码262个氨基酸，含有高度保守的RING-H2型RING指结构域、跨膜结构域和GLD结构域，是一个新的马铃薯ATL (Arabidopsis toxico para levadura)蛋白。StRFP***位于马铃薯第3条染色体上，不含内含子。马铃薯***组中可能有1-2个StRFP***拷贝或与之同源性高的***。利用洋葱表皮细胞进行的StRFP-GFP融合蛋白亚细胞***结果显示，StRFP在细胞膜上或膜外表达。

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