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亚细胞***公司电话「在线咨询」

发布时间:2020-03-11 01:10:46        






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多胺作为一种多聚阳离子,在***表达、蛋白活性等多层面调节细胞功能。多胺转运蛋白能够特异性介导多胺类物质跨膜运输,在调节多胺浓度、调控抗性***表达、维持mRNA水平、增强植物抗逆性等方面具有重要功能。目前,已知拟南芥(Arabidopsis thaliana)LHR1***编码质膜多胺转运蛋白AtPUT3,控制多胺的吸收,参与植物热胁迫早期反应中的分子调控过程,但水稻中(Oryza sativa),多胺参与植物热胁迫早期反应的具体分子机制尚不明确。通过序列对比,发现水稻Os02g47210和Os03g37984是拟南芥AtPUT3的功能同源***。为了初步阐明水稻多胺转运蛋白LHR1在热胁迫早期防御反应及提高植物耐热性上的功能,本研究利用生物信息学、生化与分子生物学实验、遗传学等手段对水稻LHR1同源***的功能进行初步研究,结果如下:1.了水稻OsLHR1(Os03g37984.1、2、3和Os02g47210)***全长CDS,并对该***编码的蛋白质进行有效的生物信息学分析,结果显示:Os03g37984有5种不同的剪切方式,编码5种OsPUT3蛋白。



以苎麻优良品系"5041-3"子叶作为受体,利用根***农介导法进行了绿色荧光蛋白***的遗传转化研究,农菌株为EHA105,重组质粒为pBINm-GFP5-ER。经农浸染后的子叶外植体经过共培养、选择培养、伸长培养和生根培养后再生出抗性植株,对抗性植株的再生过程进行了GFP荧光检测,结果表明,GFP***能在苎麻中强烈表达,证明GFP***能够在苎麻遗传转化中得到应用。对抗性植株的Southern杂交检测证实外源***已整合到苎麻***组中。




为建立根***农介导的香蕉***遗传转化系统,本研究以雄性花诱导产生的贡蕉胚性悬浮系为转化受体,从潮筛选浓度和筛选方法两方面进行了优化。研究结果表明,贡蕉悬浮系在M2液体培养下潮的适合筛选浓度为5mg/L。将液体共培养7d后的贡蕉胚性悬浮系转接到M2液体筛选培养基进行培养,每10d继代一次。GUS***染色表明,经过3代抗性筛选的ECS几乎全为转化细胞。经过3个月的胚诱导培养获得成熟抗性体细胞胚,平均抗性体细胞胚得率为4580个/mLPCV。同时,转化苗的PCR检测结果表明,gus***已整合到贡蕉***组中。本研究表明液体筛选系统有利于转化胚性悬浮细胞的增殖,大大地提高了香蕉转***的转化效率。

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