洋葱亚细胞定位培养-武汉思特进科技公司

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。

几丁质酶(chitinase)是一种能够将几丁质水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶，广泛存在于植物细胞中，是抗真菌防卫反应体系的重要组成部分.该文深入分析了1种三七几丁质酶基因PnCHI1的功能.构建PnCHI1的亚细胞定位载体，转入洋葱表皮细胞中瞬时表达，在激光扫描共聚焦显微镜下发现PnCHI1定位于细胞壁中.构建PnCHI1的原核表达载体，诱导并纯化获得重组蛋白，体外平板抑菌实验结果显示PnCHI1原核重组蛋白对尖孢镰刀菌、茄腐镰刀菌、轮枝镰刀菌3种三七根腐病菌的菌丝生长具有很强的抑制活性.采用反向遗传学技术验证PnCHI1的功能，通过根癌农介导将PnCHI1转入中过量表达.qRT-PCR分析结果表明PnCHI1在T2代转基因中大量表达，同时叶片接种实验显示PnCHI1转基因对茄腐镰刀菌的抗性增强明显.结论:PnCHI1是定位于细胞壁的几丁质酶，体外能抑制几种三七根腐病真菌，在过表达大大提高了对茄腐镰刀菌的抗性，推测PnCHI1是三七中参与根腐病防卫反应的重要抗病基因.

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。

了红树植物‘白骨壤’中甜菜碱／脯氨酸转运蛋白基因（BetlProT2），采用根瘤农介导的方法，将携带有GFP报告基因的35S—Bet／ProT2-GFP融合质粒转化洋葱表皮细胞，亚细胞定位分析表明，Bet／ProT2是定位在细胞质膜上的跨膜蛋白。进一步利用农介导法将Bet／ProT2转人粳稻‘日本晴’，鉴定结果表明，BetlProT2基因已经整合到‘日本晴’的基因组中并有效表达。转Bet/ProT2基因水稻的耐盐性明显提高，在甜菜碱和脯氨酸同时或分别存在的条件下，转基因水稻可以在含有150mmol·L^-1NaCl的液体培养基中正常生长，同时叶片中H2O2含量较低；而野1生型水稻在相同处理条件下出现明显枯萎，洋葱亚细胞定位培养，叶片中H2O2大量积累。结论：红树Bet／ProT2基因能通过吸收甜菜碱和／或脯氨酸来降低氧化伤害，显著提高转基因水稻的耐盐能力。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。

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